|
|
T4 DNA连接酶 |
| CAS No.: |
9015-85-4 |
| 分子式： |
|
| 分子量： |
|
| 备注： |
中文名称T4DNA连接酶中文同义词T4连接酶;RNALIGASE,T4PAHGE,RECOMBINANT,SOLN.英文名称T4DNALIGASE英文同义词T4DNALIGASE;RNALIGASE,T4PAHGE;DNALIGASE;DNALIGASENAD-DEPENDENT;DNALIGASET4;DNALIGASE,THERMOSTABLE;EC6.5.1.1;EC6.5.1.2CAS号9015-85-4分子式分子量0EINECS号232-770-0相关类别生化试剂-酶类;DNA操作;DNA连接;核酸相关;试剂;氨基酸;生化试剂;化学试剂;分子生物试剂-核酸相关;分子生物学-克隆/点突变系列;EnzymeMol文件MolFile结构式T4DNA连接酶性质储存条件−20°C形态缓冲甘油水溶液T4DNA连接酶用途与合成方法应用T4DNA连接酶即T4DNA连接酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子T4DNALigase即T4DNA连接酶，可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合，该催化反应需ATP作为辅助因子。概述T4DNA连接酶Chemicalbook用于体外DNA连接、连接检测PCR，体内冈崎片断连接成完整基因组DNA有重要作用。基因工程所用DNA连接酶由公司提供，最常用的是T4DNA连接酶（T4Lig）。连接机理与结构目前DNA连接反应机理是基于切口双链DNA底物得到的：普遍认为连接反应由三步完成：①T4连接酶先由ATP供能产生E-AMP复合物；②E-AMP复合物识别双链DNA切口位置，将AMP转移到5’-P基团，形成5’-P-AMP复合物；③3’-OH亲核攻击5’-P-AMP形成磷酸二酯键，并释放出AMP。连接酶分子大小T4连接酶由T4嗜菌体30基因合成，最早从T4嗜菌体感染的E。coli提取。后来发现DNA复制缺失型嗜菌体中连接酶产量更高，从而作为连接酶的主要来源，目前市场供应连接酶通过基因工程方法生产。Murry测定T4连接酶分子量为63000~68000Da，Armstrong进一步确定为55，230Da，由487个氨基酸（Aa）残基组成，基因长度1464bp（GenBank序列号为X00039）。按照分子量与分子大小比例关系估算，T4连接酶大小约3。4nm，可跨越约1个DNA双螺旋长度（即10bp）。连接酶占据连接端口下游（5’-P端部）7~10bp，占据端口上游（3’-OH端部）3~5bp。 |
 |
|
声明：以上信息未经本网证实,仅供参考,华夏化工网不承担任何风险责任. |
|
